Page 192 - Cellular Imaging in Regenerative Medicine, Cancer and Osteoarthritis

Chapter 9
te kunnen traceren. Een manier om dit te bereiken is door SPECT beeldvorming. In Hoofdstuk 7 hebben we de waarde van de SSTR2 onderzocht als een nieuwe beeldvormingsmarker voor pro-inflammatoire macrofagen, opnieuw met behulp van het DMM artrose muismodel. Eerst evalueerden we de genexpressie niveaus van SSTR2, in zowel niet-gestimuleerde als in interferon gamma (IFNγ) en tumor necrose factor alfa (TNFα) gestimuleerde menselijke macrofagen, door middel van een kwantitatieve polymerasekettingreactie. De expressie van SSTR2 mRNA nam significant toe met een factor 3,6 ten opzichte van die in niet-gestimuleerde macrofagen. Een soortgelijk effect werd ook waargenomen bij synoviaal weefsel van OA patiënten. Bovendien resulteerde stimulatie van primaire monocyten afgeleide macrofagen met IFNγ + TNFα in vitro in een significante toename van [111In]In-DOTA-TATE opname. Om de relevantie van SSTR2 tracer als een marker voor pro-inflammatoire macrofagen in vivo vast te stellen, werd de aanwezigheid van macrofagen en opname van SSTR2 tracer in de tijd bestudeerd in een DMM muismodel voor OA. DMM en sham geopereerde knieën werden histologisch gekleurd voor CD64. Het aantal CD64-positieve cellen, wat wijst op pro-inflammatoire macrofagen, was op dag 1 en 3 verhoogd en nam de daarop volgende weken langzaam af. Voor ons in vivo beeldvormend onderzoek zijn scans met hoge resolutie van het grootste belang, omdat het doelwit erg klein is (knie van een muis). Daarom hebben we een met indium-111 gelabelde tracer gebruikt. Indium-111 is een radionuclide dat gebruikt wordt met SPECT, een techniek die in de prekliniek een hogere spatiele resolutie heeft dan preklinische PET. Met SPECT werden verhoogde hoeveelheden radioactiviteit gevonden in de knieën gedurende de eerste 7 dagen na DMM chirurgie, gevolgd door een geleidelijke afname in de tijd. Hierin zagen we een soortgelijk patroon voor zowel de knieën waarin artrose werd veroorzaakt door DMM als voor de knieën die een sham-operatie ondergingen. Zoals in deze studie werd aangetoond, was de instroom van macrofagen tijdsafhankelijk en geassocieerd met de ontwikkeling van artrose. Instroom van macrofagen werd ook waargenomen in de sham- knie, waarschijnlijk als gevolg van de ontstekingsreactie op weefselschade veroorzaakt door chirurgische manipulatie. Opgemerkt moet worden dat de sham knieën geen structurele kraakbeenschade of osteofyt vorming vertoonden.
190