Page 200 - Molecular features of low-grade developmental brain tumours

9
198
CHAPTER 9
In hoofdstuk 4 hebben we het coderende en niet-coderende transcriptoom van SEGA’s geanalyseerd en laten we zien dat genen gerelateerd aan signaleringsroutes zoals de MAPK/ERK-route, welke een belangrijke regulator is van cel proliferatie en overleving, anders tot expressie komen in SEGA’s in vergelijking met controle weefsel. Analyse op eiwitniveau bevestigde dat de MAPK/ERK-route geactiveerd is in SEGA’s. Het remmen van deze signaleringsroute onafhankelijk van een mTOR-blokkade zorgt voor minder proliferatie van primaire SEGA cellen en suggereert dat de MAPK/ERK-route kan worden gebruikt als een doelwit voor behandeling van SEGA’s. In SEGA’s is er verhoogde expressie van LAMTOR1-5 op zowel gen- als eiwitniveau in vergelijking met controle weefsel. Samen kunnen LAMTOR1-5 een complex vormen, bekend als het “Ragulator” complex, waarvan bekend is dat het zowel de mTOR- als de MAPK/ERK-route activeert. Hiermee laten we zien dat er een mogelijk verband is tussen de constitutief geactiveerde mTOR-route en de MAPK/ERK-route in SEGA.
In hoofdstuk 5 werd de rol van de extracellulaire matrix in SEGA’s in meer detail bestudeerd. Matrix metalloproteïnasen (MMP’s) samen met hun endogene inhibitoren, TIMP’s, zijn verantwoordelijk voor het reguleren en moduleren van de extracellulaire matrix. Verder is het bekend dat MMP’s en TIMP’s betrokken zijn bij biologische processen zoals tumorgenese, proliferatie, celmigratie en angiogenese. Een verhoogde expressie van verschillende MMP’s en TIMP’s in SEGA ten opzichte van controle weefsel toont aan dat het MMP/TIMP-proteolytische systeem ontregeld is in SEGA’s. Een lagere expressie van microRNA (miRNA) miR-320d was gevonden in SEGA’s in vergelijking met controle weefsel en werd tevens geïdentificeerd als potentiële regulator van MMP2, MMP11, MMP14, MMP15 en MMP19. In humane foetale astrocyten zien we dat over-expressie van miR-320d MMP2 expressie kan verlagen. Dit suggereert dat het remmen van MMP’s met miR-320d of een combinatie van miR-320d met andere miRNA’s die MMP’s kunnen remmen interessant kan zijn als potentieel therapeutische strategie voor TSC-patiënten met SEGA.
In hoofdstuk 6 vonden we verhoogde expressie van miR-519d en miR-4758 in GG’s in vergelijking met controle weefsel, DNT’s en andere astrocytomen, waaronder SEGA’s. Dit suggereert dat deze miRNA’s kunnen worden beschouwd als aanvullende markers voor de classificatie van LEAT’s. De PI3K/AKT3/P21-route, een signaleringsroute die vaker gedereguleerd wordt in tumorcellen, is ook gedereguleerd in GG’s. de verhoogde expressie van miR-519d in een astrocyten cellijn zorgde voor een lagere expressie van CDKN1A (P21) en meer proliferatie, terwijl co-transfectie met miR-4758 dit effect tegenwerkte. Dit suggereert dat deze miRNA’s mogelijk samenwerken als regulatoren van de celcyclus bij laaggradige gliomen.
De bevindingen van deze studies worden besproken in hoofdstuk 7. Samengevat laat dit proefschrift zien dat de MAPK/ERK-route geactiveerd is in SEGA’s, wat suggereert dat deze route kan worden gebruikt als doelwit voor behandeling onafhankelijk van, of in combinatie met mTOR-remmers voor TSC patiënten met SEGA’s. Deze activering kan niet worden verklaard door de BRAFV600E-mutatie, een mutatie die vaak ten grondslag ligt bij GG’s en andere laaggradige GNT’s. De verhoogde expressie van LAMTOR1-5 in SEGA’s biedt een nieuwe link tussen de MAPK- en mTOR-route in SEGA’s, twee belangrijke signaleringsroutes